Фрагмент ДНК породжених травлення з одного endonuclease обмеження буде мати доповнюють один одного 5´ і 3´ розширень (липкою кінцях). Якщо ці кінцеві отжигают і ligated, фрагмент ДНК буде були перетворюються на коло ковалентно закрито, або circularized.