Фермент, що каталізують на реакцію, яка пов'язує дві молекули ДНК через утворення phospho diester зв'язок між 3´ гідроксильну так і 5´ фосфатної суміжних нуклеотидів. Він відіграє важливу роль у репарації ДНК і реплікації. ДНК-лігази є одним з основних інструментів рекомбінантних ДНК технології, що дозволяє (серед іншого) включення іноземних ДНК до векторів. Лігази фермент закодованих за фага T4 зазвичай використовується в ген клонування експериментів. Вона вимагає АТФ як супутній фактор. Т4 є використовуваних у Витри приєднатися вектор і вставити ВНУ.