รวมของโมเลกุลเชิงเส้นเอ็นทั้งสอง โดยการก่อตัวของ phospho diester ขายหุ้นกู้ ในโคลนทดลอง ส่วนข้อจำกัดคือมักจะ ligated กับโมเลกุล linearized เวกเตอร์ที่ใช้ T4 DNA ligase