Condizioni di reazione - in particolare temperatura, concentrazioni di sale e pH - che dettano la ricottura del singolo-incagliato DNA/DNA, RNA/DNA e RNA/RNA ibridi. All'alto rigore, duplex formano solo tra fili con perfetta complementarità biunivoca; bassa stringenza permette di ricottura tra i filamenti con un certo grado di mancata corrispondenza tra basi.