La sintesi delle proteine nella provetta da molecole di mRNA purificato utilizzando estratti cellulari contenenti unità secondarie ribosomal, i fattori proteici necessari, molecole di tRNA e sintetasi tRNA di aminoacyl, ATP, GTP, amminoacidi e un sistema enzimatico per ri-generare i trifosfati del nucleoside. Sistemi di traduzione prokaryotic sono preparati solitamente da E. coli o il batterio termofilo, Bacillus stearothermophilus. Sistemi eucariotici solitamente impiegano lisati dei reticolociti di coniglio o di germe di grano.