Metode untuk sequencing lama (mengatakan 1 kb) kloning potongan DNA. Awal Sekuensing reaksi mengungkapkan urutan pertama beberapa ratus nukleotida DNA kloning. Berdasarkan data ini, primer yang berisi tentang 20 nukleotida dan melengkapi urutan pada penghujung DNA sequencing disintesis, dan kemudian digunakan untuk berikutnya beberapa ratus nukleotida kloning DNA sequencing. Prosedur ini diulang sampai urutan nukleotida lengkap DNA kloning ditentukan.