Bakteri yang mempertahankan pewarna tertentu setelah dicuci dalam larutan asam. Paling acid-fast organisme adalah mycobacteria. Ketika AFB terlihat pada smear bernoda dahak atau spesimen lain klinis, diagnosis TB harus dicurigai; Namun, diagnosis TB tidak dikonfirmasi sampai budaya yang tumbuh dan diidentifikasi sebagai M. tuberkulosis.