Sekvence nukleotidů jednovláknovými nechal na fragment omezení typu II omezení enzymy, které každý pramen na jiném místě. Tyto nepárové oblasti jsou k dispozici pro hybridizace s doplňkovou končí na jiných fragmenty během vytváření Rekombinantní DNA. aka vyčnívající konec; převis; soudržné konec.